病毒感染是威脅人類及動(dòng)物生命健康的主要問(wèn)題。為解決流感問(wèn)題，人們研發(fā)了多種抗病毒類藥物，起初這些藥物研發(fā)僅用于解決人類流感問(wèn)題，然而多次流感事件也造成大量畜禽死亡，帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，養(yǎng)殖戶便將抗病毒類藥物摻入飼料中對(duì)禽畜進(jìn)行喂養(yǎng)。然而，將人類藥物移植獸用，不僅沒(méi)有準(zhǔn)確的科學(xué)依據(jù)，并且長(zhǎng)期使用會(huì)造成動(dòng)物中毒、藥物殘留、病毒抑制或變異等，進(jìn)而影響人類的身體健康。但由于抗病毒類藥物價(jià)格低廉、效果顯著，因此仍被養(yǎng)殖戶大量使用，然而所造成的副作用也越來(lái)越大。動(dòng)物食品中抗病毒類藥物的殘留已成為公眾廣泛關(guān)注的問(wèn)題。

來(lái)自中國(guó)肉類食品綜合研究中心的張穎穎和李瑩瑩對(duì)目前的抗病毒類藥物殘留檢測(cè)方法進(jìn)行簡(jiǎn)要概述，以期為抗病毒類藥物殘留檢測(cè)提供一定的理論依據(jù)。

1. 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）具有選擇性強(qiáng)、靈敏度高、檢出限低等特點(diǎn)，是當(dāng)前快速檢測(cè)的主要方法之一。ELISA試劑盒檢測(cè)限為0.25 μg/kg，回收率為82.5%～91.0%。該方法操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高，可以用于日常動(dòng)物源性樣品的快速檢測(cè)；雙抗體夾心（DAS）-ELISA法，用于測(cè)定豬α-干擾素的含量。此方法不受其他基質(zhì)的干擾，準(zhǔn)確性高。

2.色譜法

氣相色譜法

氣相色譜（GC）不適于直接分析沸點(diǎn)高及熱穩(wěn)定性差的化合物。而大多數(shù)抗病毒類藥物沸點(diǎn)高，且易溶于水，因此在樣品前處理過(guò)程中需用有機(jī)試劑來(lái)提取待測(cè)物，并進(jìn)行衍生化，才能進(jìn)入GC進(jìn)行檢測(cè)，整個(gè)操作過(guò)程相對(duì)繁瑣、易引入雜質(zhì)、重現(xiàn)性相對(duì)較差，因此在抗病毒藥物殘留檢測(cè)方面應(yīng)用較少。Farajzadeh等創(chuàng)建了測(cè)定金剛烷胺的GC法，該方法溶劑使用量相對(duì)少、檢出限低。樓永軍等設(shè)置了合適的程序升溫過(guò)程，用質(zhì)量選擇檢測(cè)器（MSD）測(cè)定金剛烷、溴代金剛烷、金剛烷胺及副產(chǎn)物金剛烷醇的電子轟擊（EI）譜圖，用于結(jié)構(gòu)確認(rèn)；利用FID檢測(cè)器進(jìn)行定量測(cè)定，其檢出限為2 ng。

氣相色譜-質(zhì)譜法

GC-質(zhì)譜（MS）法同GC法一致，樣品需進(jìn)行衍生化，操作過(guò)程繁瑣，因此GC-MS法測(cè)定抗病毒類藥物的報(bào)道相對(duì)較少。Herold等創(chuàng)建了毛細(xì)管GC-MS法，用于測(cè)定血漿中的金剛乙胺含量，經(jīng)選擇離子監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行儀器掃描測(cè)定。

液相色譜法

液相色譜（LC）分析過(guò)程不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。目前，測(cè)定抗病毒類藥物的LC法中主要采用2種檢測(cè)器，即紫外檢測(cè)器（UVD）與熒光檢測(cè)器（FLD），然而大部分抗病毒類藥物無(wú)較強(qiáng)的紫外吸收和熒光吸收，因此在樣品前處理過(guò)程中也會(huì)進(jìn)行衍生化操作。Jing Shaojun等創(chuàng)建了測(cè)定金剛烷胺的高效液相色譜-熒光檢測(cè)法，檢出限為0.1 ng/mL。Cui Shuangjin等以9,10-蒽醌-2-磺酰氯（ASC級(jí)）作為衍生化試劑，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證所生成的衍生物能夠長(zhǎng)期穩(wěn)定存在；過(guò)量的衍生化試劑會(huì)與流動(dòng)相中的甲醇進(jìn)行反應(yīng)，生成甲基氫醌-2-磺酰酯，其保留時(shí)間與待分析化合物的衍生物的保留時(shí)間不同，因此不會(huì)影響金剛烷胺、金剛乙胺及美金剛的分析鑒定，最終其檢出限為20 ng/mL。

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

目前，80%以上的抗病毒藥物殘留檢測(cè)方法均是液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）法，其具有分離效果好、靈敏度高、檢出限低、回收率高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。LC-MS/MS可用于測(cè)定各種基質(zhì)樣品，通過(guò)多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式可減少基質(zhì)干擾、提高準(zhǔn)確性、避免假陽(yáng)性和假陰性現(xiàn)象。

毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳是具有分析速度快、分辨率高、穩(wěn)定性好、消耗溶劑少等優(yōu)點(diǎn)，可以作為LC的替代或互補(bǔ)技術(shù)。但由于其重現(xiàn)性差，使得分析結(jié)果的可靠性降低。Reichová等創(chuàng)建了用于測(cè)定金剛烷胺、金剛乙胺、美金剛殘留量的毛細(xì)管電泳方法。Laborde-Kummer等用毛細(xì)管電泳法測(cè)定了市售膠囊中奧司他韋的含量，該方法具有選擇性高、準(zhǔn)確度高、分析時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，檢出限與定量限分別為0.97 ?g/mL與3.24 ?g/mL。

3.光譜法

分光光度法

分光光度法具有應(yīng)用廣泛、選擇性好、靈敏度高、分析成本低等優(yōu)點(diǎn)。Rizk等提出用紫外分光光度計(jì)定量測(cè)定含有伯胺基團(tuán)的藥物——鹽酸金剛烷胺、苯環(huán)丙胺硫酸鹽和氨甲環(huán)酸，該方法的回收率分別為（99.68±0.92）%、（100.3±0.75）%、（99.8±0.76）%；Raut等通過(guò)紫外分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定奧司他韋的含量，該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高，檢測(cè)限為0.342 ?g/mL；Mustafa等測(cè)定阿昔洛韋的含量，回收率分別為99.32%和98.77%；此外金剛烷胺在pH 3.0的條件下可與3價(jià)鐵形成絡(luò)合物，在295 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度可用于準(zhǔn)確定量。

近紅外光譜技術(shù)

近紅外光譜（NIR）具有快速、操作簡(jiǎn)單、樣品少、不消耗化學(xué)試劑、不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)。Dou Ying等利用NIR鑒別金剛烷胺，并創(chuàng)建人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型進(jìn)行定量，通過(guò)不斷優(yōu)化參數(shù)設(shè)定，最終該方法可以準(zhǔn)確測(cè)定金剛烷胺的含量；Titova等也建立了NIR法用于測(cè)定金剛烷胺的含量。然而創(chuàng)建近紅外方法過(guò)程中需采用大量有代表性的樣品進(jìn)行建模，并且該模型需要根據(jù)測(cè)定的樣品不斷地進(jìn)行維護(hù)改進(jìn)，無(wú)形中增加了工作量；若參比方法精度不夠，NIR測(cè)定的結(jié)果也會(huì)產(chǎn)生偏差。因此目前NIR方法在食品安全檢測(cè)方面還未得到廣泛應(yīng)用。

電化學(xué)傳感器檢測(cè)法

電化學(xué)傳感器是操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)迅速、測(cè)定準(zhǔn)確，可用于日常監(jiān)督檢測(cè)中。Salem等基于修飾碳糊和石墨涂層的離子選擇性電極制備電化學(xué)傳感器，用于測(cè)定藥物及人尿樣中的金剛烷胺和嗎啉胍的質(zhì)量濃度，該電極制備簡(jiǎn)單、使用方便，并且成本低，可以用于實(shí)際樣品中金剛烷胺和嗎啉胍的含量測(cè)定；此外Jalali等用β-環(huán)糊精修飾的碳電極測(cè)定藥物中金剛烷胺的含量，該法反應(yīng)靈敏、操作簡(jiǎn)便。

芯片法

芯片法操作快速簡(jiǎn)便，可進(jìn)行高通量測(cè)定，是未來(lái)快速、高通量檢測(cè)方法的研究熱點(diǎn)之一。蔡自由等首次提出通過(guò)微流控芯片來(lái)測(cè)定片劑中的金剛烷胺含量。該方法消除了電極污染，降低了背景噪音，提高了檢測(cè)靈敏度、穩(wěn)定性和重復(fù)性。

自“速成雞”事件以來(lái)，抗病毒類藥物的濫用再次引起了廣泛關(guān)注，進(jìn)而針對(duì)食品中抗病毒類藥物殘留檢測(cè)方法的研究再次成為熱點(diǎn)，其中應(yīng)用最廣的便是 LC-MS/MS法，該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、準(zhǔn)確性好，是當(dāng)前食品檢測(cè)行業(yè)的主流方法，然而該方法在檢測(cè)過(guò)程中需要大型精密儀器且檢測(cè)費(fèi)用昂貴，不適合執(zhí)法部門的市場(chǎng)監(jiān)督及企業(yè)的內(nèi)部自檢，因此需要?jiǎng)?chuàng)建更簡(jiǎn)便快速、高通量的檢測(cè)方法，例如ELISA試劑盒、高通量芯片、傳感器等，這些或許會(huì)成為將來(lái)分析檢測(cè)發(fā)展的主要方向之一。