合成色素以苯、甲苯、萘等化工產品為原料，經過磺化、硝化、鹵化、偶氮化等一系列有機反應制成合成著色劑，合成著色劑有一定毒性，過多食用會危害人體健康，但由于人工合成著色劑成本低、色澤鮮艷、著色力強、色調多樣，故被廣泛使用；合成著色劑有嚴格的控制使用范圍和最大使用量，因此食品中合成色素的準確測定具有重要意義。

 

      對于食品中合成著色劑的檢測目前可借鑒國標GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測定》，分別采用高效液相色譜法，薄層色譜法，示波極譜法進行定性定量分析，其中高效液相色譜法前處理采用聚酰胺吸附法或液-液分配法進行色素提取。

 

     該方案特別適用于食品中檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅和亮藍等人工合成著色劑的檢測。

 

    1、樣品準備

1.1 可樂樣品

 取1 g可樂(加熱超聲驅除二氧化碳)，40 μL甲酸于試管中，搖勻，作為上樣液待凈化。

1.2 紅薯粉樣品

(1) 取2 g樣品 與20 mL提取劑*混合，渦旋2 min，超聲提取10 min，6000 rpm下離心3 min，收集上清液；

(2) 將下層殘留物依次用10 mL、10 mL提取劑重復提取兩次，合并三次提取上清液；

(3) 將上清液在45℃水浴條件下，減壓蒸餾至6 mL，再加入80 μL甲酸，混勻，待凈化。

提取劑*：氨水+70%乙醇（1+99，體積比）。

 

    2 、SPE柱凈化——ProElut  PLS  500 mg/6 mL（Cat.#：68005）

2.1 可樂樣品SPE柱凈化流程

(1) 活化/平衡：

 5 mL甲醇活化，5 mL水平衡，流出液棄去；

 (2) 上    樣：

 將待凈化液加入小柱，流出液棄去；

 (3) 淋    洗：

 5 mL 2%甲酸水溶液，流出液棄去，將小柱抽干；

 (3) 洗    脫：

 4 mL 2%氨水-甲醇溶液洗脫，收集流出液，2%氨水-甲醇溶液調至中性；

 (4) 重新溶解：

 在40 ℃下用減壓蒸餾將收集液濃縮至近干，然后用50%甲醇水溶液定容至1 mL后供HPLC分析。

 

2.2 紅薯粉樣品SPE柱凈化流程

(1) 活    化：

 5 mL甲醇，5 mL水活化；

 (2) 上    樣：

 加入待凈化液，棄去流出液；

 (3) 淋    洗：

 加入4 mL水，棄去流出液，將SPE柱抽干；

 (4) 洗    脫：

 加入6 mL 2%氨水甲醇溶液，收集流出液；

 (5) 重新溶解：

 將洗脫液在45 ℃下氮氣吹至約0.5 mL，再用水定容至1 mL，微孔濾膜過濾后供HPLC分析。

 

       3、分析條件

色譜柱：

 Inspire C18，250 × 4.6 mm，5 μm

流  速：

 1.0 mL/min

 檢測器：*

 UV 254 nm

 柱  溫：

 35℃

 進樣量：

 20 μL

 流動相：

 A：乙腈，B：0.02 mol/L 乙酸銨溶液

 梯度

時間（min）	0	20	30	31	40
A（%）	5	30	37	5	5
B（%）	95	70	63	95	95

 

      4、添加回收結果

 

4.1 紅薯粉添加回收結果

紅薯粉中人工合成著色劑（添加水平為5 mg / kg）的添加回收結果

目標物	檸檬黃	莧菜紅	胭脂紅	日落黃	誘惑紅	亮藍
回收率	83.46%	83.18%	87.84%	94.59%	93.90%	101.28%

 

4.2可樂添加回收結果

分析物	添加水平(mg/kg)	回收率/%	RSD(n*=4)/%
檸檬黃	1.6	97.9	3.77
莧菜紅	2.4	97.1	2.77
靛 藍	2.4	72.3	3.73
胭脂紅	3.2	98.2	1.31
日落黃	2.8	90.8	2.19
亮 藍	10.4	96.5	0.84
赤蘚紅	7.2	90.7	2.49

*n：平行樣品的數量

標簽:  食品安全 人工添加劑 快速檢測